Die Hauptsehenswürdigkeit in Holtenau ist die Holtenauer Schleuse, die aus insgesamt vier Schleusenkammern besteht. Im Norden liegen die beiden 1895 in Betrieb genommenen Alten Schleusen, südlich davon die beiden 1914 eingeweihten Neuen Schleusen. Die Schiffe werden in den vier Kammern durchschnittlich um 10 m gehoben oder gesenkt, was jeweils zwischen 30 und 45 Minuten dauert. An der Holtenauer Schleuse gibt es auch einen Kanalfischer, der morgens bis etwa 10 Uhr am nördlichen Zugang zu den Schleusen direkt vom Schiff aus seinen Fang verkauft - im Frühjahr gehören dazu auch Heringe. Der Kanal ist wegen seines geringen Salzwassergehalts und der Art seiner Uferböschungen ein beliebter Laichplatz für diesen Fisch geworden.
